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    ELISA試劑盒(BA法)放大系統

    發布時間: 2015-09-28  點擊次數: 2812次

    1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。
    應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質,再與HRP標記的待測物質抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,ELISA試劑盒經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中待測物質濃度。
    BA-ELISA分為:
    1,LAB法即酶聯親和素-生物素標記法(Labeledavidin-biotin,簡稱LAB)。用辣根過氧化物酶直接標記親和素,用生物素標記第二抗體。
    2,ABC法即酶聯親和素-生物素-過氧化物酶復合物法(Avidin-Biotin-PeroxidaseComplex,簡稱ABC)。如用鏈霉親和素(Streptavidin),則形成鏈霉親和素-酶聯生物素復合物(Streptavidin-Biotin-PeroxidaesComplex,簡稱SABC)。在ABC法中,用生物素標記第二抗體,ELISA試劑盒又用生物素標記過氧化物酶。在使用前30min,親和素與酶聯生物素以1:1的比例混勻。1個親和素分子結合3個生物素分子,親和素剩下的1個結合點與標記第二抗體的生物素結合,親和素起橋聯作用。ABC法比PAP(Peroxidase-antiperoxidasetech-nique)法敏感幾十倍。
    3,BAB法即酶聯親和素-生物素橋法(Bridgedavidin-biotin,簡稱BAB)。用游離親和素(或鏈霉親和素)作為橋聯劑,將生物素標記后開成的復合物與酶標記生物素連結起來,然后進行樣品的檢測。由于標記抗體分子上連有多個生物素,因此,ELISA試劑盒zui終形成的抗原-生物素標記抗體-親和素-酶標生物素復合物可積聚大量的酶分子;加入相應底物后,產生強烈的酶促反應,大幅度提高檢測的靈敏度。
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    Human IL-18 Quantikine ELISA Kit    1 Kit
    Human VEGF-C Quantikine ELISA Kit  DVEC00  1 Kit
    Human VEGF Quantikine ELISA Kit   DVE00  1 Kit
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