上海研域生物|原代細(xì)胞污染是怎樣造成的

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一、違規(guī)操作：

1. 為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗。

2. 器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用。

3. 超凈臺不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗。

4. 不帶手套，徒手操作。

5. 原代細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等儀器設(shè)備以及的實驗服和拖鞋，未定期消毒，物品被帶出原代細(xì)胞房使用，培養(yǎng)原代細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用（通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37％烤干備用）。

二、超凈臺和桌面，東西太多太亂

超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺，這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。原代細(xì)胞房其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在原代細(xì)胞房，一不小心“飄"進(jìn)你的原代細(xì)胞培養(yǎng)板里，原代細(xì)胞就會養(yǎng)不好了。

三、培養(yǎng)箱太久沒清潔

原代細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的原代細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，也要隔段時間用酒精擦擦托盤。

四、原代細(xì)胞房人多口雜，難管理

在原代細(xì)胞房這種衛(wèi)生要求高，人一多不確定的因素也就多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴鞋套，就容易造成原代細(xì)胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的原代細(xì)胞。

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