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細(xì)胞因子ELISA試劑盒在處理和保存方面需考慮的問(wèn)題？？？
發(fā)布時(shí)間： 2019-08-20 點(diǎn)擊次數(shù)： 1504次一、血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離，則能夠在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下。
二、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所形成的的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
三、要注意防止呈現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，然后與后面加入的HRP底物反響顯色。
四、冰凍保存的血清標(biāo)本須注意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生破壞效果，然后引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進(jìn)行劇烈振動(dòng)，重復(fù)倒置混勻即可。
五、細(xì)胞因子ELISA試劑盒，樣本的采集及血清別離中要注意盡量防止細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的成長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定辦法發(fā)生非特異性干擾。