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    ELISA試劑盒注意事項(xiàng)和具體操作過(guò)程

    發(fā)布時(shí)間: 2017-09-22  點(diǎn)擊次數(shù): 1580次

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    ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
    1. 取出板條前康復(fù)到室溫后再打開外包裝袋,試驗(yàn)中不必的板條當(dāng)即放回包裝中,密閉封口,其他不必試劑應(yīng)蓋好。
    2. 試驗(yàn)操作中請(qǐng)運(yùn)用一次性的吸頭,避免穿插污染。
    3.試驗(yàn)板孔參加試劑的順序應(yīng)共同,以保證一切反響孔的孵育時(shí)間共同。
    4.洗刷過(guò)程中反響孔中殘留的洗刷液應(yīng)在濾紙上充沛拍干,勿將濾紙直接放入反響孔中吸水。
    5.試劑盒內(nèi)試劑請(qǐng)?jiān)诒Y|(zhì)期內(nèi)運(yùn)用,不同批號(hào)試劑不要混用。
    6.1000pg/ml以上的成果為非線性的,根據(jù)此規(guī)范曲線無(wú)法得到準(zhǔn)確的成果。大于1000pg/ml 的樣品應(yīng)以規(guī)范稀釋緩沖液稀釋后重做。在成果剖析時(shí),結(jié)合考慮相應(yīng)的稀釋度。

     

    ELISA試劑盒操作過(guò)程:關(guān)于elisa試劑盒的具體操作過(guò)程:
    1.取出試劑盒室溫平衡30min,取出血樣放至室溫。
    2.配規(guī)范品:取150uL規(guī)范品參加150uL規(guī)范品稀釋液稀釋,順次稀釋5次。
    3.加樣:別離于各反響孔中參加規(guī)范品50uL,樣品40UL,規(guī)范品做復(fù)孔,樣品做3孔。
    4.別離于樣品孔中參加10UL抗體。
    5.規(guī)范品和樣品孔中別離參加50uL鏈酶親和素-HRP,蓋上封板膜,悄悄震動(dòng)混勻,37℃溫育60min。
    6.配洗刷液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
    7.洗刷:當(dāng)心揭開封板膜,棄去液體,甩干,每孔加200uL洗刷液,靜置30s后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
    8.顯色:每孔先參加顯色劑A 50uL,再加顯色劑B 50uL,悄悄震動(dòng)混勻,37℃避光顯色6min。
    9. 停止:每孔參加停止液50uL,停止反響(此刻藍(lán)色當(dāng)即轉(zhuǎn)為)。
    10.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度。測(cè)定應(yīng)在加停止液10min之內(nèi)進(jìn)行。
    11.保存成果,拾掇桌面。
    12.剖析處理數(shù)據(jù)

     

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