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    如何讓ELISA試劑盒陽性判定值更準確

    發(fā)布時間: 2017-01-26  點擊次數(shù): 2099次

    ELISA試劑盒試驗3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此計劃,則棄去,算了另兩個陰性對照從頭核算NCX;
    如有兩個陰性對照A值超出以上計劃,則該次試驗無效。
    在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。
    現(xiàn)舉某種檢查 HBsAg的試劑盒為例。
    先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行核算。
    核算方法有多種,大致可分為陽性斷定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng /ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。
    ELISA試劑盒陽性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對許多標本的試驗檢查而得到的。ELISA試劑盒陽性斷定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為區(qū)別作用陽性或陰性的規(guī)范。
    用此法區(qū)別作用央求試驗條件非常穩(wěn)定,試劑的制備有必要規(guī)范化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規(guī)范,須配用精密的儀器,并嚴重按規(guī)則操作。
    ELISA試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,目視法簡捷明晰,但頗具主觀性。
    測得A值后,先核算陰性對照A值的平均數(shù)(NC X )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有用。
     

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